有一二三级标题的论文xxx 第1篇
第 2 章 ××× （第一层标题）
××× （第二层标题）
××× （第三层标题）
（正确的格式）
xxx文设置三级标题， 不提倡使用三级以上标题。
2、 正文内容编号 两层编号， 采用：
（1）
××× ① ××× （正确的格式）
三层编号， 采用：
（1）
××× ① ××× a． ×××一级节标题 黑体三号二级节标题 黑体四号三级节标题 黑体小四号正 文 xxx小四号表题与图题 xxx小四号参考文献及篇眉 xxx五号 2. 段落及行间距要求 正文段落和标题一律取“固定行间距 20 磅”。
按照标题的不同， 分别采用不同的段后间距：
标题级别 段后间距大 标 题 30～36 磅 一级节标题 18～24 磅二级节标题 12～15 磅三级节标题 6～9 磅 3.
有一二三级标题的论文xxx 第2篇
论文摘要和关键词。
2、论文摘要应阐述学位论文的主要观点。说明本论文的目的、研究方法、成果和结论。尽可能保留原论文的基本信息突出论文的创造性成果和新见解。而不应是各章节标题的简单罗列。摘要以 500 字左右为宜。
关键词是能反映论文主旨最关键的词句一般 3-5 个。
3、目录。既是论文的提纲也是论文组成部分的小标题应标注相应页码。
4、引言或序言 。内容应包括本研究领域的国内外现状本论文所要解决的问题及这项研究工作在经济建设、科技进步和社会发展等方面的理论意义与实用价值。
5、正文。是毕业论文的主体。
6、结论。论文结论要求明确、精炼、完整应阐明自己的创造性成果或新见解以及在本领域的意义。
7、参考文献和注释。按论文中所引用文献或注释编号的顺序列在论文正文之后参考文献之前。图表或数据必须注明来源和出处。
参考文献是期刊时书写格式为
参考文献是图书时书写格式为
有一二三级标题的论文xxx 第3篇
一级标题 第1章 (小二，黑体，居中，数字 Times New Roman,中间空一个字符，段前段后空18磅)
一级标题比较好写。如果是写三段论式的论文，那么一般是类似“引言——国内外研究现状——***发展现状——***存在的问题——***发展的促进建议”;如果是写实证类论文，一般是“引言——国内外研究现状——机理推导或研究假设——模型构建与实证分析——结论与建议”。因为一级标题都是类似，所以找个C刊的论文或者硕博士论文，看一下就知道了。
有一二三级标题的论文xxx 第4篇
一、页面设置一、页面设置 纸型：A4 纸型 上下边界：25mm 左右边界：25mm 行距：固定值 24 磅 字体：xxx 字号：标题四号加粗，正文五号 页码：暂不设置页码
二、论文格式二、论文格式 ************（中文题目，一般不超过（中文题目，一般不超过 20 个字）个字）
院系名称（小四号黑体）
摘要（五号黑体）：摘要（五号黑体）：*****************************（中文，五号仿宋。摘要是科研论文主要内容的简短、扼要的重述，必须表达论文本身新的、最具特色的内容，重点是结果和结论；.一般以第三人称的语气写，避免用“本文”、“我们”、“本研究”等作为文摘的开头。）
关键词（五号黑体）：关键词（五号黑体）：***************************（中文，五号仿宋，一般选取 3～8 个词，每个词之间应留有空格以区别之。）
正文（五号xxx（五号xxx*************************************************** ***************************************************************************************************************************************** 说明：xxx内必要的解释性说明词语可采用“注释”形式，其序码以圆括号放在加注处右上角，内容排在加注处所在页的页下，页下注序码每页单独排序。②表格设计必须清晰、规范，每个表格除有栏头、表身外还应在表的上方居中标明表序和表题，中间空一格将两者分开；表随文放，一般应列在“见表×”文字的自然段落的下面，在正文中要明确提及见表×；表格一般采用三线表。③插图要求大小比例适中，数字清晰，照片黑白对比分明；图也应随文字放在“见图×”文字的自然段落下面；每幅图都要有图序和图题，通常写在图的下方居中位置。④论文内各大部分标题用“一、二┅┅” ，次级标题为“ （一）
、 （二）┅┅” ，三级标题用“1、2┅┅” ，四级标题用“ （1）
、 （2）┅┅” 。不再使用五级以下标题。
参考文献（黑体五号，在正文后居中排版）参考文献（黑体五号，在正文后居中排版）
参考文献是期刊时为〔序号〕著者.题名[J].期刊名，出版年份，卷号(期号):页码. 参考文献是图书时为〔序号〕著者.书名[M].版次.出版地:出版社,出版年份.页码.
*************（英文题目，小四号（英文题目，小四号 Times New Roman））
Abstract:******************************************************************************************************************************
Key Words: ****； ****； ****
附：医科论文格式样板参照附：医科论文格式样板参照 人纤溶酶原人纤溶酶原K5基因与真核表达载体基因与真核表达载体pPICZ A重组体的构建重组体的构建
光华口腔学院
xxx 指导教师
xxx xxx
摘要: 以K5/pET22b（+）为模板用xxx的方法扩增人纤溶酶原kringle5基因，并用Xba I和EcoR I双酶切目的基因和真核表达载体pPICZA， 胶回收试剂盒纯化酶切产物， 用DNA T4连接酶连接目的基因和载体构建重组体K5/pPICZA，并转化进大肠杆菌DH5，筛选阳性菌落，xxx鉴定重组体K5/pPICZA，为人纤溶酶原K5在真核系统中表达提供基础性研究。
关键词: 人纤溶酶原; kringle结构; 基因克隆
新生血管的生成为恶性肿瘤生长提供营养， 也是恶性肿瘤转移的必要条件， 抑制新生血管在一定程度上可以减缓肿瘤细胞的恶性扩增， 因此， 基于抑制血管生成的治疗成为肿瘤治疗的热点。
1994 年, O`Reilly 等人从荷瘤小鼠的尿液和血清中分离纯化得到血管生成抑制素(angiostatin) , 它与人纤溶酶原 kringle1～4 功能区有同源性, 具有抑制毛细血管内皮细胞增殖、 抑制血管生成和转移瘤生长的生物活性[1] 。
动物试验研究还表明, 血管生成抑制素对纤维肉瘤细胞株、人乳腺癌、结肠癌、前列腺癌细胞株在小鼠体内形成的肿瘤也有很强的抑制作用[2] 。
最近, Gao 等[3]发现人纤溶酶原的 kringle5 功能区有比 angiostatin 更强的抑制内皮细胞生长的活性。本课题在已获得原核体系中表达的活性 K5 蛋白基础上，进一步构建K5/pPICZA 重组体，以期在真核表达体系中获得有活性 K5 蛋白。
一、材料和方法 一、材料和方法
（一）材料 含K5/pET22b（+）重组体的 BL21(DE3)为本室构建并保存；EcoR I 和Xba I为New England公司产品；酵母粉、胰蛋白胨为OXIOD公司产品；IPTG购自北京鼎国生物技术公司；抗生素zeocin为Sigma公司产品，pfu Tag DNA聚合酶和质粒pPICZA均购自invitrogen公司，DNA胶回收试剂盒购自NOVAGEN公司，其他试剂为分析纯；引物由赛百盛公司合成。
（二）聚合酶链反应（xxx）扩增K5基因 以K5/pET22b（+）重组体为模板，上游引物为：5`-CGAATTCCCAGATGTAGAGACTCCTTC-3`，5`端设计有EcoRI的酶切位点；下游引物为：5`-CTCTAGAGCGGCACACTGAGGGACATCACA-3`，5`端设计有Xba I的酶切位点，建立xxx反应体系：ddH2O 38l，10pfu Buffer 5l，4dNTPs 4l，K5 primer(+) l，K5 primer(-) l，K5/pET22b（+）1l，pfu Tag DNA聚合酶l。混匀后，进行xxx反应，反应条件：95℃预变性3m，95℃变性80s，54℃复性100s，72℃延伸2m，循环30次，72℃延伸10m。扩增完毕后，取样5l，于的琼脂糖凝胶上进行电泳，检测是否有扩增产物K5基因。
（三）
K5基因和载体的酶切及酶切产物的纯化 xxx产物K5 DN_段经酚/氯仿抽提、 乙醇沉淀纯化后，用EcoR I 和Xba I两种酶同时消化，质粒pPICZA同样用EcoR I与Not I进行双酶切，双酶切体系组成：ddH2O l，10Buffer 5l，100BSA l, DNA 2g , EcoRI l, XbaI l，总体积50l。酶切产物按照DNA胶回收试剂盒操作方法进行纯化，纯化产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定后，用Genegenuis凝胶分析系统进行DNA相对定量。
（四）
重组体的构建及转化
纯化后的产物在T4 DNA 连接酶作用下进行连接反应， 反应体系：K5 DNA 8l，pPICZA l，Buffer l，T4 DNA Ligase l，ddH2O l，总体积20l。
反应液于16℃水浴反应18小时， 置于4℃待转化。
然后导入感受态的大肠杆菌DH5（感受态细胞的制备参见《分子克隆》），涂布于含25g/ml zeocin抗生素的LB板上，37℃过夜培养。
（五）
阳性菌落的筛选及鉴定
挑取LB平板上单克隆菌落， 接种于无菌含25g/ml zeocin的LB培养基，过夜培养。参照《分子克隆》中质粒DNA提取方法抽提培养物的质粒DNA，TE溶解DNA，于-20 ℃保存。以抽提DNA为模板，引物和xxx体系同前，鉴定菌落DNA中是否存在目的基因，初步判定重组体构建成功与否。
二、实验结果 二、实验结果 （一）xxx反应获得目的基因K5片段
通过xxx反应获得K5基因片段，琼脂糖凝胶
电泳示目的基因大小约为288bp（如图1所示，含设计的双酶识别序列），与理论推测的基因片段大小一致。
100bp 图1. xxx反应扩增目的基因 1~7：xxx扩增的目的基因片段；M：标准分子量DN_段 （二）
K5基因和pPICZA载体双酶切产物的纯化和定量
目的基因K5和载体pPICZA经EcoR I 和Xba I消化后，用的琼脂糖凝胶电泳和胶回收试剂盒纯化酶切产物（如图2A），并电泳鉴定纯化后的产物，Genegenius凝胶分析系统对DNA进行相对定量示：K5 为l, pPiczA为 ng/l。
图2. 目的基因与载体双酶切及酶切产物纯化与相对定量 A：酶切前后；B：酶切产物纯化后鉴定；1：酶切前载体pPICZA；2：酶切后xxx产物；3：酶切后载体pPICZA；4：xxx酶切产物纯化后；5：载体酶切产物纯化后；M：标准分子量1 200bp 300bp 400bp 500bp 600bp 700bp 800bp 900bp 1038bp 289bp 1 234567MA B 2 3 4 M 5 100bp 200bp 300bp 400bp 500bp 600bp 700bp 800bp 900bp 1038bp
DN_段 （三）xxx鉴定阳性菌落
转化菌接种含有25g/ml zeocin的LB平板后，有单克隆菌落产生，挑取菌落扩增培养抽提质粒DNA，以其为模板xxx鉴定含重组体菌落（如图3）：从重组菌质粒DNA中能扩增出目的基因片段，大小与从阳性K5/pET22b（+）扩增出的目的基因相一致，而以空载体为模板则不能扩增出目的片段。
图分析重组转化菌株表达产物 1：阳性模板K5/pET22b（+）扩增产物；2：重组菌质粒DNA扩增产物；3：质粒pPICZA扩增产物；M：DNA分子量标准
三、讨 论三、讨 论
人纤溶酶原kringle5 功能区具有抑制毛细血管内皮细胞增殖 、迁移的作用[3，4], 这是血管形成过程的两个关键步骤， 推测人纤溶酶原kringle5 功能区可能具有抑制血管形成和肿瘤生长的特性。本课题组已获得从原核体系中表达的活性K5蛋白，但对其活性是否受细菌内毒素的影响及其天然构象是否发生改变尚不清楚。本实验是前期工作的基础上，构建K5与真核表达载体pPICZA的重组体，为下一步的K5真核表达体系的建立提供给出行研究。
人纤溶酶原的Kringle 5功能区约由91个氨基酸组成，编码该蛋白的基因约有289bp。本实验首先用xxx的方法从K5/pET22b（+）扩增出目的基因，其大小理论推算一致。目的基因和载体pPICZA均用EcoRⅠ和XbaI两限制性核酸内切酶酶切，产物纯化后进行连接反应，并转化进宿主菌DH5，挑选单克隆菌落，xxx方法能从重组菌中扩增出目的基因片段，初步鉴定了K5/pPICZA重组体，为后续工作提供基础。
参 考 文 献 [1] O`reillym S, Holmgren L, Shing Y, et al. Angiostatin:a novel angiogenesis inhibitor that mediates the suppression of metastases by a Lewis lung carcinoma [J ]. Cell , 1994, 79: 1 2 3 M100bp 300bp 500bp 700bp 目的基因
315-328. [2] O`reillym S , Holmgren L, Chen C, et al. Angiostatin induces and sustains dormancy of human primary tumors in mice [J ] . Nat Med, 1996, 2: 689-692. [3] Zhang D, Kaufman PL, Gao G （xxx）
, et al. Intravitreal injection of plasminogen kringle 5, an endogenous angiogenic inhibitor, arrests retinal neovascularization in rats. Diabetologia 2001 Jun;44(6):757-65.
[4] Gao G （xxx）
, Li Y, Gee S, et al. Down-regulation of vascular endothelial growth factor and up-regulation of pigment epithelium-derived factor: a possible mechanism for the anti-angiogenic activity of plasminogen kringle 5. J Biol Chem 2002 Mar 15;277 (11):9492-7.
Construction of the Recombinant of Plasminogen Kringle 5 and pPICZA
Abstract : The gene encoding kringle 5 of human plasminogen was amplified from the template of K5/pET22b （+）
by polymerase chain reaction. The K5 gene fragment and the vector of pPICZA were digested by Xba I and EcoR I. The product of digestion was purified by gel purification kit and ligated by T4 DNA ligase to construct the recombinant of K5/pPICZA. Then the recombinant was transducted into of DH5 and cultured overnight. The colony was screened by the antibiotic of zeocin and identified by polymerase chain reaction. Keywords : human plasminogen；kringle5 domain；gene cloning；
FoxP3 的研究新进展的研究新进展 中山医学院
xxx 指导老师
xxx 摘要：
FoxP3 是一个转录因子，它和调节性 T 细胞的发育和功能密切相关。
FoxP3 表达过多或者过少都会影响到机体中免疫系统，FoxP3 基因的突变更会引起严重的自身免疫病。对 FoxP3 的深入研究将有助于了解机体免疫调节机制，对于肿瘤治疗，自身免疫病治疗，诱导移植物耐受等方面将大有好处。
关键词：调节性 T 细胞；CD4 + CD25 + 调节性 T 细胞；免疫调节；免疫耐受
调节性 T 细胞(Treg)是 T 细胞的一种，它们有控制免疫应答反应和诱导免疫耐受的功能。这些 Treg 在许多实验模型里都已经得到证实，一般是 CD4+ T 细胞，并且相当部分是表达CD25 分子(IL-2 受体 a 链)，包括自然产生的(在胸腺里自然发育成熟的)和在外周血中的 T细胞经诱导产生的等。最近的研究表明 Treg 的功能相当广泛，它们几乎涉足所有的免疫反应，包括过敏症，感染，炎症，移植物排斥反应和肿瘤免疫等。另外，最近研究在早产婴儿的脐带血中 CD25+ CD4+ Treg 的减少规律这个实验还表明 Treg 在先天性免疫方面也发挥着重要的功能[1]。
FoxP3 是一个转录因子，它和调节性 T 细胞的发育和功能密切相关。下面就谈谈目前 FoxP3 的研究进展情况。
一、一、FoxP3 的发现以及定位的发现以及定位 转录因子是一些多结构域的蛋白质，常根据其结合 DNA 的保守区域来分类。forhead区域第一次被证实是作为一个和老鼠肝细胞核因子 3 相同的果蝇 melanogaster 转录因子forkhead[2]。forkhead 区域包含一段 110bp 的 DNA 结合的保守区域，它能通过特异性结合DNA 而调节下游基因的表达。各种 forkhead 家族的转录因子在多种发育过程起重要作用，例如信号的传导，细胞的分化和发育等。FoxP3 转录因子就是该家族的成员之一， 它是在科学家在研究 IPEX(The immune dysregulation，
polyendocrinopathy，
enteropathy，
X-linked syndrome)时发现的，定位在 X 染色体上 [3]。
二、二、FoxP3 表达的细胞表达的细胞
Hori S 和 Sakaguchi S 等人已经证实 FoxP3 是调节性 T 细胞发育和功能的关键性基因，它主要在 CD4+CD25+T 细胞表达[4]。在老鼠和人上，胸腺和外周来源的 CD4+CD25+T 细胞都高表达 FoxP3 mRNA ，特别是胸腺来源的。通过分析基因组的表达，Bruder D 等人发现Neuropili...